最新无码AV免费久久,久久久久亚洲AV成人网人人网站,日韩精品久久久久久,久久国产乱子伦精品免费乳及

您好!歡迎訪問保定米奇生物科技有限公司網(wǎng)站!
全國服務(wù)咨詢熱線:

19801430409

當前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 蛋白濃度測定的方法

蛋白濃度測定的方法

更新時間:2022-07-21      點擊次數(shù):1773
  蛋白濃度測定的方法:
 
  1. 紫外分光光度法
 
  紫外光譜吸收法測定蛋白質(zhì)含量是講蛋白質(zhì)溶液直接在紫外分光光度計中測定的方法,不需要任何試劑,操作簡單且易回收。蛋白質(zhì)溶液在280nm附近有強烈的吸收,這是由于蛋白質(zhì)中酪氨酸、色氨酸殘基而引起的,所以光密度受這兩種氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取過程中雜有的核酸對測定結(jié)果引起極大誤差,其最大吸收在260nm。所以同時測定280及260nm兩種波長的吸光度,通過計算可得較為正確的蛋白質(zhì)含量。
 
  2. 雙縮脲法
 
  利用半飽和硫酸銨或27.8%硫酸鈉——亞硫酸鈉可使血清球蛋白沉淀下來,而此時血清白蛋白仍處于溶解狀態(tài),因此可把兩者分開,這種利用不同濃度的中性鹽分離蛋白的方法稱為鹽方法。鹽析分離蛋白質(zhì)的方法不僅用于臨床醫(yī)學,而且還廣泛地用于生物化學研究工作中,如一些特殊蛋白質(zhì)—酶、蛋白激素等的分離和純化。
 
  蛋白質(zhì)和雙縮脲一樣,在堿性溶液中能與銅離子形成紫色絡(luò)合物(雙縮脲反應(yīng)),且其呈色深淺與蛋白質(zhì)的含量成正比,因此可于蛋白質(zhì)的定量測定。
 
  但必須注意,此反應(yīng)并非蛋白質(zhì)所*,凡分子內(nèi)有兩個或兩個以上的肽鍵的化合物以及分子內(nèi)有—CH2—NH2等結(jié)構(gòu)化合物,雙縮脲反應(yīng)也呈陽性。本實驗用27.8%硫酸鈉—亞硫酸鈉溶液稀釋血清,取出一部分用雙縮脲反應(yīng)測定蛋白質(zhì)的含量,剩余部分則用濾紙過濾,使析出的球蛋白與白蛋白分離,取出濾液用同一反應(yīng)測定白蛋白的含量??偟鞍着c白蛋白含量之差即球蛋白的含量。白蛋白與球蛋白之比即所謂的白/球比值。
 
  3. Folin-酚試劑法
 
  目前實驗室較多用Folin-酚法測定蛋白質(zhì)含量,此法的特點是靈敏度高,較雙縮脲高兩個數(shù)量級,較紫外法略高,操作稍微麻煩,反應(yīng)約在15分鐘有最大顯色,并最少可穩(wěn)定幾個小時,其不足之處是干擾因素較多,有較多種類的物質(zhì)都會影響測定結(jié)果的準確性。其原理是蛋白質(zhì)中含有酚基的酪氨酸,可與酚試劑中的磷鉬鎢酸作用產(chǎn)生蘭色化合物,顏色深淺與蛋白含量成正比。
 
  4. 考馬氏亮藍G-250
 
  此方法是1976年Bradform建立。染料結(jié)合法測定蛋白質(zhì)的優(yōu)點是靈敏度較高,可檢測到微量蛋白,操作簡便、快迅,試劑配制極簡單,重復(fù)性好,但干擾因素多??捡R氏亮藍G-250具有紅色和青色兩種色調(diào)、在酸性溶液中游離狀度下為棕紅色,當它通過疏水作用與蛋白質(zhì)結(jié)合后,變成藍色,最大吸收波長從465nm轉(zhuǎn)移到595nm處,在一定的范圍內(nèi),蛋白質(zhì)含量與 595nm的吸光度成正比,測定595nm處光密度值的增加即可進行蛋白質(zhì)的定量。
 
  以上便是實驗室中常見的幾種蛋白濃度測定的方法,另外還有凱氏定氮法和BCA法,有凱氏定氮法結(jié)果精確,但操作復(fù)雜,BCA法又以其試劑穩(wěn)定,抗干擾能力較強,結(jié)果穩(wěn)定,靈敏度高而受到歡迎。
保定米奇生物科技有限公司
地址:保定市惠陽街369號保定中關(guān)村創(chuàng)新基地研發(fā)中心15層1508室
郵箱:info@michlab.cn
傳真:
關(guān)注我們
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號
了解更多信息
日本SM/羞辱/调教/捆绑视频| 看曰本女人大战黑人视频| 国产精品久久久久久av| 亚洲成AV人片在线观看无 | 国产亚州精品女人久久久久久| 精品国产日韩欧美一区二区| 99精品一区二区三区无码吞精| 国产欧美日韩亚洲一区二区三区| 熟妇人妻无乱码中文字幕| 色人阁亚洲天堂| 先锋AV资源| IPHONE14欧美日韩版本区别| 国内精品久久久久久久久野战| 欧美人成网站在线| 免费精品国自产拍在线播放| 少妇特殊按摩高潮惨叫无码| 成人午夜影院| 日韩激情无码免费毛片| 国产毛多水多高潮高清| 国产成人一区二区三区影资源| 亚洲香蕉毛片久久网站老妇人| 少妇真人直播APP| 成人H视频在线观看| 日日碰狠狠添天天爽无码| 国产午夜鲁丝片AV无码| 国产成人精品视频一区二区不卡| free性开放小少妇| 99精品一区二区三区无码吞精| 久久精品丝袜高跟鞋| 十二寡妇肉床艳史| 国产精品伦一区二区三级视频| 人人妻人人藻人人爽欧美一区| 久久人人爽人人爽人人片AV高清| 91福利网址在线观看| 久久精品国产亚洲AVAPP下载| 国产AV无码专区亚洲AV麻豆丫| 国产精品国产精品国产专区不卡| 人喾交性专区免费看| 国产精品亚洲精品日韩已方| 最新中文字幕av专区 | 亚洲天堂色图图片|